如何選擇合適的熒光標(biāo)記？當(dāng)選擇熒光標(biāo)記時(shí)，需要自問(wèn)以下問(wèn)題：
一、您顯微鏡上的濾光片/激光源是什么?
首先您需要知道您顯微鏡上的濾光片/激光源。他們將會(huì)決定您可以使用什么樣的熒光蛋白或染料用來(lái)激發(fā)和顯現(xiàn)。
二、您計(jì)劃在一個(gè)樣品上應(yīng)用幾個(gè)熒光素？
如果您在樣品上使用一個(gè)以上的熒光素，那么您需要仔細(xì)挑選其他的熒光染料來(lái)最小化光譜重疊。您可以通過(guò)查看激發(fā)和發(fā)射光譜來(lái)決定使用哪一對(duì)染料，以降低他們的激發(fā)和發(fā)射光譜重疊。
如果您使用激光來(lái)激發(fā)熒光素，您只要確保您的激光 (ie. 488 nm) 不會(huì)同時(shí)激發(fā)兩種以上的染料即可。如果該激光可觸發(fā)到第二個(gè)熒光染料的激發(fā)光譜，那么在激發(fā)第一個(gè)染料時(shí)您可能會(huì)少量地激發(fā)到了第二個(gè)染料，而如果這時(shí)您 的濾光片也能接受第二個(gè)染料的發(fā)射光，您就會(huì)得到不準(zhǔn)確的信號(hào)。
然而如果您用來(lái)接收發(fā)射光譜的濾光片剛好不能接收到第二個(gè)染料發(fā)射的光，那么您拍得的圖片就看不到這段重疊光譜，就沒(méi)有問(wèn)題。
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